这是我们系里几位老师编译的目前最新的肺癌标记物检测指南。供大家参考。

肺癌生物标志物检测指南建议草案（临床简缩版）

第一部分   什么情况下进行分子检测？

1．哪些患者需要做EGFR突变和ALK重排检测？

1.1、根据临床特征（如年龄、性别、种族、吸烟史）来选择患者做EGFR或ALK检测不够灵敏；

1.2、不管组织学分级或亚型如何，有腺癌成分的所有非小细胞肺癌都应该进行EGFR和ALK检测；

1.3、单纯鳞状细胞癌、小细胞癌或神经内分泌癌无需进行EGFR和ALK检测；

1.4、仅见鳞状细胞癌或小细胞癌的小块活检组织、或不完整切除组织，也可以进行EGFR和ALK检测；

1.5、分化差的肿瘤或不能确定为单纯鳞状细胞癌、小细胞癌或神经内分泌癌的肿瘤都应该进行EGFR和ALK检测；

1.6、不再接受“非小细胞”肺癌（NSCLC）作为一个病理诊断名词或者对于临床处理有用的类别；

1.7、在没有可替代的靶向抑制药物的情况下，原发肿瘤和转移瘤同样适合进行EGFR和ALK检测；

1.8、对于有两处明显分开的原发癌的病人，两处肿瘤都应该进行EGFR和ALK检测；

1.9、不主张在同一个肿瘤中检测多个不同的区域。

2. 什么情况下需要对患者的标本进行EGFR突变或ALK重排检测？

2.1、Ⅲ期或Ⅳ期病人在作出诊断时就应该进行EGFR突变或ALK重排检测；

2.2、Ⅰ期或Ⅱ期病人是否做EGFR/ALK检测，应该取决于本地各医疗机构，以及与肿瘤护理团队的合作情况；

2.3、必须从所有病人的标本中分出用于EGFR和ALK检测的组织。

第二部分   如何进行EGFR检测？

4．进行EGFR突变检测的标本应如何处理？

4.1、新鲜\冷冻\酒精固定或福尔马林固定石蜡包埋组织均可满足以PCR为基础的EGFR突变检测的要求；

4.2、其他组织处理方式（酸性或重金属固定剂、媒染剂或脱钙溶液）可能会影响EGFR检测成功率，应在外科病理报告中予以说明；

4.3、组织样本应置于10%中性缓冲福尔马林中固定6-48小时，固定时间过长应在外科病理报告中予以说明；

4.4、对于细胞学样本，细胞块比涂片更适于进行EGFR检测。

5.4、检测的有效性验证应包括由病理学家对每例样本的肿瘤含量进行评估；

5.5、应由病理学家或由病理学家指导培训过的技师对异质性肿瘤样本进行肿瘤细胞富集；

5.6、建议使用手工分离未染色切片（白片）中的相应区域进行肿瘤细胞的富集。

7. 在选择使用EGFR抑制剂进行靶向治疗的患者时，检测KRAS的作用是什么？

7.1、不推荐KRAS检测作为抗EGFR治疗的唯一决定因素。

8. 对EGFR TKI获得性（继发性）耐药患者进行用药调整时，还有哪些其他分子标志物检测是可以考虑的？

8.1、对获得性耐药患者进行EGFR检测，可在低至5%的肿瘤细胞中检测出T790M突变；

8.2、不推荐对获得性耐药患者常规进行其他EGFR继发性突变的筛查；

8.3、不推荐对获得性耐药患者常规进行MET拷贝数分析。

第三部分   如何进行ALK检测？

9.  ALK检测应该如何进行？

9.1、ALK的检测对象应当与EGFR检测的推荐人群及肿瘤类型一致；

9.2、病理学家对切片进行评估时，与标本中肿瘤成分所占百分比是否充足相比，肿瘤的结构和细胞学特点更为重要；

9.3、福尔马林固定石蜡包埋的样本可以进行ALK FISH检测；

9.4、必须用分离-双标ALK探针进行ALK FISH检测；

9.5、与相似类型样本的其它FISH检测一样，ALK FISH需要相同的切片预处理及杂交步骤；

9.6、ALK FISH切片需要在FISH检测方面经过训练的或有经验的病理学家的指导下，由两名独立的、经过特殊的实体瘤FISH分析训练的记录者进行判读；

9.7、ALK FISH的判读应该针对切片中大部分细胞都具有清晰可辨的杂交信号的区域进行；

9.8、 在ALK分离探针FISH检测中，信号的窄小分离可以出现在没有ALK重组的样本中，所以必须建立阳性样本的信号分离尺度的判读标准；

9.9、其他异常的意义不明的FISH结果应如实报告；

9.10、 50个检测细胞中超过15%的细胞出现重组应被判读为ALK阳性肿瘤；

9.11、每一个病例都应该由两名独立的观察者判读，由一名经过FISH训练的细胞遗传学家或病理学家确认判读；

9.12、ALK FISH的质量控制与其他实体瘤的FISH检测的质量控制一样进行。

10.是否有其他方法替代FISH进行ALK重排检测？

10.1、对于选择做ALK抑制剂治疗的患者，目前不推荐应用免疫组化的方法替代FISH；

10.2、对于选择做ALK抑制剂治疗的患者，目前不推荐应用RT-PCR的方法替代FISH；

10.3、对于临床管理而言，目前不建议进行ALK抑制剂的获得性耐药的基因突变检测。

第四部分   对于肺腺癌，应该常规检测其它基因吗？

11．对于肺癌，是否需要检测其它分子标志物？

11.1：除EGFR和ALK外，其它分子标志物目前对于肺腺癌的临床处理没有提示意义。包括：BRAF、PI3KCA、HER2、MET、ERCC、TS、RRM1。

第五部分   怎样实施和操作肺腺癌的分子检测？

12．所有的肺腺癌都必须同时检测EGFR和ALK吗？

12.1、在保证总的检测周期时间的前提下，采取序贯检测法可提高肺腺癌分子检测的效率，可按下列方式进行：1）先检测EGFR，如果阴性，则进行ALK检测；2）先行K-RAS检测，如果阴性，进行检测EGFR，如果阴性，则进行ALK检测。

2.1、Ⅲ期或Ⅳ期病人在作出诊断时就应该进行EGFR突变或ALK重排检测”是指做出病理诊断时，诊断符合第一项的情况时进行基因检测。Ⅲ期或Ⅳ期病人由于其它的治疗方式有限，所以首选基因检测，实行靶向治疗。而Ⅰ期或Ⅱ期病人，由于分期早，还可以有较多其它的治疗机会，因此是否做EGFR/ALK检测，取决于本地各医疗机构，以及与肿瘤护理团队的合作情况。