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组织切片脱片严重具体原因是什么?

seaskylong 离线

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楼主 发表于 2012-07-19 11:12|举报|关注(0)
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 组织切片脱片严重具体原因是什么?谢谢!

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医者仁心
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xclbljys 离线

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1 楼    发表于2012-07-19 22:22:13举报|引用
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组织病理学切片制作过程中脱片原因分析

李玉绿 陈庆林 邹鹰 (中南大学湘雅医学院组胚教研室,湖南长沙410078)

在组织学和病理学教学及临床诊断中,观察的绝大多数都是用常规染色的石蜡切片.在制作石蜡切片的染色过程中,作者经常遇到组织片从载玻片上脱落的现象,这不仅造成材料的浪费,而且造成前期取材,固定,切片,贴片等大量工时的浪费.为此,作者等总结多年的实践经验,对组织切片在染色过程中脱片原因进行了分析.

1脱片原因

1.1粘附剂因素在制作组织学和病理学石蜡切片时,一般用甘油蛋白做粘附剂,但若甘油蛋白配制的时间过长,蛋白质变性,甘油蛋白的粘附作用即降低,可导致组织切片与载玻片粘附不牢,切片一进入二甲苯溶液即从玻片上脱落下来.

1.2温度的影响常规石蜡切片染色,温度一般在20-37较好.但一旦进入冬季,长江以南地区室内如无恒温暖气控制,室内温度偏低,染色较困难,故多采用二甲苯加温脱蜡(恒温箱37).组织从二甲苯脱蜡出来,立即进入室温的纯酒精清洗,这样组织一下从37降至4℃左右,一冷一热,热胀冷缩,造成组织容易从载玻片上脱落下来.

1.3玻片的影响从商家购进的载玻片,上面一般有油脂物,有的还有霉点,如果只单纯用干净布擦,起不了多大作用,载玻片上的油脂和霉点仍将直接造成组织和载玻片的粘附不牢,而引起脱片.

1.4脱水,浸蜡时间的影响组织取材后,在脱水,浸蜡时间和包埋温度上掌握不够准确,特别是腺体组织比较娇嫩,稍有过头组织就变脆,在染色过程中就极易出现脱片现象.

2脱片对策

2.1试剂因素实验室备用的甘油蛋白,平常不用时应保存于4℃冰箱中,一般3个月后要重新配制.总之粘附剂是越新鲜越好.

2.2避免冬季温度影响①要么采用系列加温,即脱蜡及以后的洗蜡,去汞,去碘,水洗等步骤均一一加温.②采取二甲苯加温脱蜡后,待二甲苯的温度降至室温后,再将组织切片取出进行以后的其他染色步骤.总的要求是,使组织切片在温差不大的条件下完成染色,避免组织脱片.

2.3玻片因素在制作切片前,所有玻片均须经洗涤液或浓盐酸浸洗

2.4,然后用自来水充分冲洗干净,再用蒸馏水洗一遍后,擦干待用,保证玻片干净无污渍.

2.5时间因素组织取材固定后,要视不同组织控制好脱水和浸蜡的时间,掌握好包埋温度.如脑垂体,胰腺,腮腺等腺体组织的脱水和浸蜡的时间均比一般组织要短,而肌层厚的,管状的或空心的组织,如子宫,睾丸,肺等脱水和浸蜡时间则比一般组织时间要长.作者在实践工作中,按上述方法处理,有效地防止了切片制作过程中的脱片现象.

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seaskylo..
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许春雷

文长江 离线

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2 楼    发表于2012-07-19 22:42:11举报|引用
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我认为常规制片脱片太多的常见原因是:1,切片太厚.2,烤蜡时间不够,你试试从这两方面考虑.

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seaskylo..
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yueban 离线

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3 楼    发表于2012-07-20 16:41:27举报|引用
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我真不明白有的单位为什么总脱片?记得以前我自己制片时很少脱片。开始还用蛋白甘油防止脱片,后来不用也不脱片了。

我的体会是:1、不能懒、不能怕麻烦;2、认真、规范对待取材及制片的每一个步骤;3、掌握好病理技术的基础理论。

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