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我们经常说冰冻切片组织不能用水冲,否则会引起冰晶。包埋剂如胶水,含有水份,所以也会引起冰晶,这样的理论对不对?
我今天特意买了一个猪肾、一块猪肝,取材取好后,分别用立即冷冻、取好后浸在水里十分钟后拿出再冷冻二种方法,然后分别采用OCT包埋和胶水包埋,结果显微镜下用肉眼看不出什么区别。
而且用胶水切的片要比OCT的平整,因为OCT的质地比较韧,容易出现切片上有横纹;OCT的收缩度往往比组织的大,切片上组织的面积往往大于OCT的外圈,因此在粘片时经常会有皱折。而胶水包埋的切片就非常平整。
所以,就这些问题我希望大家能够回去做一下,讨论一下,看看问题的真实现象是什么。
上图是用胶水做包埋剂切的片子:
我们一直都是用OCT,明天就去买一瓶胶水来试一下。另外,有时标本己经放在固定液里了,但是临床要求做冰冻(这种情况多见于手术室来了新手,不知道冰冻切片标本无须固定的那个时段),我们就先把标本捞出来,用干纱布吸水后再取材,片子切出来感觉冰晶也不太多。遇到这种标本,众网友是如何处理的?
用纱布吸干水份,可以加快冷冻速度,是一个非常好的办法。
我个人觉得组织本身都带有一定的水分,岂不是本身冰冻后就都会有冰晶产生?我觉得不是。当水分大量浸透组织后。使组织明显肿胀、水肿,这时候冰冻后的组织才会有冰晶产生。有时候,我们冰剩后的组织固定了半个小时以内还拿来做冰冻,冰晶的现象都不是很明显(当然,其中我们会做一些小处理)。个人觉得:胶水和OCT最明显的一点区别可能是细胞大小的差别,胶水包埋染出来的细胞形状感觉要小点,不过胶水包埋的组织更好切,胶水本身又很经济适用,所以我们一直用胶水。
如果是这样,可能你做的都有冰晶,只是你不认识,一直认为正常应该就是这样。