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组织制片脱片的具体原因有哪些?

seaskylong 离线

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楼主 发表于 2012-05-11 11:03|举报|关注(0)
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医者仁心
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xclbljys 离线

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1 楼    发表于2012-05-12 17:59:00举报|引用
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本帖最后由 xclbljys 于 2012-05-12 17:59:39 编辑

 在组织的常规制片、特殊染色和免疫组织化学染色时常常因组织与载玻片的脱离而致染色失败,允其是免疫组织化学染色,因操作时间长,切片在缓冲液中反复冲洗,脱片的几率就更大。


1.组织本身的因素

不同的组织脱片的情况不尽相同,其中以神经组织和血液组织最为严重,神经组织的脱片可能与其结构致密,富含神经丝、微管和类脂有关;血液组织的脱片可能与红细胞有关。其次是大动脉因含有大量的弹性纤维而易脱片 ;其他象免疫系统、消化系统、泌尿系统、内分泌系统及富含肌组织的肿瘤等均 不易脱 片 。

2. 载玻片的因素

 新的载玻片上有油污,使用时处理不十净是造成脱片的因素之一,尤其是免疫组化染色和硝酸银染色的载玻片的处理要求更严格。常用的方法是用重珞酸钾1O0g、浓硫酸 100m1和自来水1000m1配制成清洁液 。配制时注意浓硫酸的加入方法。使用时将载玻片浸泡在消洁液中12~ 24h,流水充分漂洗,蒸馏水洗,浸泡在95酒精内2h,用绸布擦干或用烤箱烤干均可 。

3. 组织的处理

脱水太过,浸蜡时间太长,透明的时间太

长,烤片的时间太短、温度不够等这些素均易导致脱片。

4.切片的厚度

 一般以3~5um为宜,切片过厚则易脱片。

5.染色前切片是否是温片

 切片在温箱中烤好后立即进行染色, 则不易脱片 ,凉片染色易脱片 ,其中以神经组织和血液组织为重。

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许春雷
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