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请教：免疫组化一个奇怪现象

linsea1124 离线: 帖子：2; 粉蓝豆：1; 经验：2; 注册时间：2012-04-12; 加关注 | 发消息

楼主发表于 2012-04-12 10:21|举报|关注(0)
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各位老师，我在染大鼠结肠的5-HT时，最后片子上某些部位总出现奇怪的着色。麻烦各位老师帮解答下，谢谢！

图1

高压修复5min,其中着色特别深的那些地方如何解释？

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王花咪离线: 帖子：19; 粉蓝豆：1; 经验：59; 注册时间：2012-03-12; 加关注 | 发消息

1 楼发表于2012-04-12 20:40:01举报|引用
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有可能是DABI染液沉渣引起来的,可以先过滤一下再染.盛装DAB染液的容器要保持干净无沉垢.每次用后及时冲洗干净.呵呵

1: 晓明

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晓明离线: 帖子：1630; 粉蓝豆：56; 经验：1784; 注册时间：2010-02-02; 加关注 | 发消息

2 楼发表于2012-04-12 20:48:29举报|引用
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引用 1 楼王花咪在 2012-04-12 20:40:01 的发言:

有可能是DABI染液沉渣引起来的,可以先过滤一下再染.盛装DAB染液的容器要保持干净无沉垢.每次用后及时冲洗干净.呵呵

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: 典型中看不典型，不典型中找典型。

水晶蔷薇离线: 帖子：454; 粉蓝豆：308; 经验：1828; 注册时间：2011-11-30; 加关注 | 发消息

3 楼发表于2012-04-12 21:50:44举报|引用
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每一步的pbs液冲洗都要仔细，可能是非特异性着色吧

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linsea1124 离线: 帖子：2; 粉蓝豆：1; 经验：2; 注册时间：2012-04-12; 加关注 | 发消息

4 楼发表于2012-04-13 08:30:29举报|引用
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谢谢各位关注！DAB染液是用浓缩液现用现稀释的，同时染的其他组织都很正常。另外这个重复多次都这样，而且如果不做抗原修复染的话也正常，但是阳性不够强。

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九华离线: 帖子：223; 粉蓝豆：29; 经验：982; 注册时间：2007-01-21; 加关注 | 发消息

5 楼发表于2012-04-13 09:54:24举报|引用
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首先着色不是细胞内而是非特异部位，再者所有强着色的物质似乎都在切片表层，与组织不在一个层面，所以说它是DAB成渣是可以的。

鉴于你说的情况会不会是某种物质高压后从组织内析出导致强着色，有兴趣可以再做些工作的

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: 病理是我的热爱，所以离开后，转身又回来了！！

dingwei 离线: 帖子：938; 粉蓝豆：1062; 经验：1175; 注册时间：2006-09-25; 加关注 | 发消息

6 楼发表于2012-05-07 08:10:43举报|引用
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我觉得抗体浓度过高了，背景中非特异性着色非常严重。把抗体稀释到无背景着色再看一下。

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: 本人观点纯属个人偏见，希望大家独立判断，正确引用！中华病理技术网：http://www.zhbljs.com/

dingwei 离线: 帖子：938; 粉蓝豆：1062; 经验：1175; 注册时间：2006-09-25; 加关注 | 发消息

7 楼发表于2012-05-07 08:18:50举报|引用
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5-HT 背景应该是很干净的，阳性却很强。

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: 本人观点纯属个人偏见，希望大家独立判断，正确引用！中华病理技术网：http://www.zhbljs.com/

llj19971997 离线: 帖子：21; 粉蓝豆：53; 经验：99; 注册时间：2011-03-28; 加关注 | 发消息

8 楼发表于2012-05-12 15:19:04举报|引用
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请问做阴性对照了么？

若是阴性对照没有问题，就很同意ding老师的意见，一抗浓度过高。

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: happy

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