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学习巴氏染色法

楼主 苏张燕 离线 发表于 2012-04-02 11:10:20举报|关注(4)  快捷回复

 

巴氏染色法
1
.试剂配制

1Harris苏木素液(同常规组织染色)
   
2)橙黄-G6液:取橙黄-G6 0.5g,溶于95%酒精100ml中,加磷钨酸15mg

3EA36液:

先配制原液(贮备液):

①亮绿液:亮绿0.5g,溶于5ml蒸馏水中,溶解后加无水酒精至100ml

②俾士麦棕液:俾士麦棕0.5g,溶于5ml蒸馏水中,溶解后加无水酒精至100ml

③伊红Y液:伊红Y0.5g,溶于5ml蒸馏水中,溶解后加入无水酒精至100ml

临用前,将上述亮绿液45ml,伊红Y45ml,俾士麦棕液10ml混合后,再加入磷钨酸0.2g,饱和碳酸锂水溶液1滴。

也可配制EA50液:

3%亮绿水溶液10ml 纯甲醛250ml

20%伊红Y水溶液20ml  冰醋酸20ml

磷钨酸2g(水溶后加入) 95%酒精700ml

2.染色步骤

1)将固定后的涂片入水、苏木素染核、盐酸酒精分化、返蓝同HE染色。
  
270%80%95%酒精逐级脱水各1分钟。
  
3)橙黄G6 3-5分钟。
  
495%酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1分钟。
  
5EA36EA505分钟。
  
695%酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1分钟。
  
7)无水酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1分钟。
  
8)二甲苯Ⅰ、Ⅱ缸透明各1分钟。
  
9)中性树胶封固。
3
.染色结果:细胞核为深蓝色;鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质为绿色;表层不全角化细胞胞质为粉红色,完全角化细胞胞质呈桔黄色;高分化鳞癌细胞为粉红色或桔黄色;腺癌细胞质呈灰蓝色;中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色;红细胞为粉红色,粘液为淡蓝色或粉红色。

本帖被 冰洋 在 2012-04-05 08:08:18 加了 1 分
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1 楼 发表于 2012-08-12 23:09:42|举报|引用返回顶部 | 快捷回复

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