请教各位老师，如何才能做好免疫荧光？肾穿标本（冰冻）怎么做才能尽可能多的切到肾小球呢？切下来的切片用什么固定液固定呢？用普通冰冻固定液固定可不可以？封片剂用常规封片的行不行？

试着回答一下：1用皮质侧组织切片；2冰冻丙酮液体固定；3我们用普通封片剂可以，您可以试试无自发荧光就行。

从前在北京军区总院做过，不过好长时间了，些许都忘了。冰冻切片然后室温放半个小时，再放入冷丙酮固定十分钟，然后PBS液洗三次就可以加抗体。抗体是1：40稀释的，加完后放37℃半个小时，然后拿出来再洗三次就行了。一般不封片，医生直接看。大概好像就是这样子做的那会。

谢谢各位老师！

谢谢

固定一般选择中性缓冲福尔马林固定液，AF固定液的效果更好，有时候为了检查组织内的糖原等物质，需用无水乙醇固定。

封片剂选择缓冲甘油封片。

将穿刺肾脏组织放在显微镜下观察 可以看到肾小球轮廓的 能够最大程度保证 冰冻切片的肾小球数目

用丙酮固定

封片 用甘油