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求助,请教各位老师这个切片染色不好的原因

千百合 离线

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楼主 发表于 2011-11-21 19:41|举报|关注(0)
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流浪de鸽子 离线

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7 楼    发表于2011-11-25 14:57:23举报|引用
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我个人感觉,有 固定不佳 和 脱蜡不净 的嫌疑,要想搞清楚,建议楼主,同一个腊块多切几张,然后分3组去染色,在染色过程中需要注意的:第一组、第一个步的脱蜡适应延长点时间,让切片中组织间的腊充分被二甲苯置换出,其它步骤按平时去染色,观察效果。第二组、二甲苯脱蜡,梯度酒精置水,然后加一步,把水洗后的切片放入AF液中进行二次固定,固定时间一般在15-25M左右,然后染色,观察效果。第三组,结合第一组和第二组方法,观察效果。

二次固定有被原理,但我亲身体会是有效果的,希望对楼主有所帮助。

还有感觉楼主的切片有点厚,不知道楼主切片机厚度调到多少的?

 

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张景春
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因能力有限,本观点纯属个人意见!

华夏齐鲁 离线

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10 楼    发表于2012-02-27 14:32:21举报|引用
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原因可能为:1、二甲苯脱蜡和透明处理不彻底。2、取材厚度偏大。

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blktyw 离线

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5 楼    发表于2011-11-23 09:04:21举报|引用
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主要是组织固定不佳引起。

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dingwei 离线

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8 楼    发表于2012-01-31 14:19:45举报|引用
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1、从血管边缘尚可、而离开血管就不清楚看,主要原因是组织固定、脱水、浸蜡不彻底。应该改变组织处理时间或浓度。你可以把处理程序放上来大家讲论一下。

2、和切片、脱蜡、染色过程没有关系。

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ezhouling2009 离线

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9 楼    发表于2012-02-12 11:40:07举报|引用
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感觉是脱水不够引起的

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liaoqiang127618 离线

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12 楼    发表于2012-03-05 17:42:43举报|引用
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按照病理技术规范操作,试剂的浓度和更换时间准确点,人勤快点,认真点,把自己的工作当成自己的家事去关心,以上的问题应该可以避免。个人愚见。

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liaoqiang127618 离线

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13 楼    发表于2012-03-05 17:44:55举报|引用
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对待工作就像对待自己的女朋友那样,我想:一切都ok

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海鸥 离线

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1 楼    发表于2011-11-21 19:49:04举报|引用
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应该是固定不好,透明也就不好,和取材有关系

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xkj2797xkj 离线

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2 楼    发表于2011-11-21 19:50:00举报|引用
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这个切片问题太多,有点严重!

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xkj2797xkj 离线

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6 楼    发表于2011-11-23 18:30:20举报|引用
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引用 5 楼 blktyw 在 2011-11-23 09:04:21 的发言:

主要是组织固定不佳引起。


是的!

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钝刀 离线

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14 楼    发表于2012-03-05 20:48:27举报|引用
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组织明显挤压,感觉像是撕扯下来的而不是切下来的,局部还发灰,高倍镜下细胞核结构模糊。这些想象表明最有可能是固定不良和脱水不充分,导致浸蜡不彻底。建议彻底更换新的固定和脱水试剂,如第一缸石蜡在常温下不凝固,则一并更换。

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xkj2797xkj 离线

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3 楼    发表于2011-11-21 20:40:23举报|引用
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建议检查是否是脱水机故障,然后,把脱水机脱水液和透明液换了!

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宁静志远 离线

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4 楼    发表于2011-11-22 12:23:13举报|引用
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本帖最后由 宁静志远 于 2011-11-22 12:23:58 编辑

感觉脱蜡也没脱净

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arhus 离线

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11 楼    发表于2012-03-05 10:23:25举报|引用
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这个组织一定是在固定前受到了VIP的特殊待遇。我想造也造不出来。我曾经特意把手术切下来的标本放在室温空气中24小时后才固定,看看到底会是啥样,结果也没有出现这样让人印象深刻的效果。我怀疑是手术标本放在什么液体(但不是固定液)中长时间没有固定造成的。前天我也遇到一例跟这例完全一样的HE切片,是某诊断公司的切片,医生硬是敢在种切片上做诊断,诊断是淋巴组织增生,一个月后又长了一个小结节,再次活检,结果是恶性度很高的淋巴母细胞淋巴瘤,病人才16岁。

要弄清楚你这张切片为什么会成这样,建议你去:1、详细了解固定和固定前的所有细节;2、自己做实验:用蒸馏水、生理盐水浸泡/放入冰箱和室温等。

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