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求助,骨组织切片为何易碎啊?

gkf 离线

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楼主 发表于 2011-11-17 15:13|举报|关注(0)
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 我们用10%的硝酸脱钙,为什么切片时易碎,即使不碎,在染色过程中也容易掉片,求助有经验的技术前辈帮助寻找原因。

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xkj2797xkj 离线

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1 楼    发表于2011-11-17 20:59:49举报|引用
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5%-10%都行,硝酸是一种很强的脱钙剂,常规应用浓度不要超过10%(5%为佳),时间一般不要长于2-3日,脱钙的组织切片后在染色过程中较容易脱片,建议充分烤片,或者在玻片涂点蛋清甘油,染色时候用自来水或温水返蓝来替代氨水返蓝。切片容易碎有可能是脱钙后(脱钙有可能有点过),组织脱水机脱水有点脱过了的原因!

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gkf 离线

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2 楼    发表于2011-11-18 09:08:41举报|引用
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 感谢老师答复!我们脱钙时间为16小时左右,股骨头适当延长时间,然后自来水冲并浸泡去除酸液,较理想的切片也千疮百孔,是不是与疾病有关?如骨质坏死、疏松、纤维化。

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gkf 离线

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3 楼    发表于2011-11-18 09:11:46举报|引用
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 再问老师,脱钙液反复用还是用一次倒了,我们一般用好久。

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xkj2797xkj 离线

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4 楼    发表于2011-11-18 19:35:41举报|引用
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引用 2 楼 gkf 在 2011-11-18 09:08:41 的发言:

 感谢老师答复!我们脱钙时间为16小时左右,股骨头适当延长时间,然后自来水冲并浸泡去除酸液,较理想的切片也千疮百孔,是不是与疾病有关?如骨质坏死、疏松、纤维化。

这个可能性小,16小时好像脱钙会欠缺点!

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xkj2797xkj 离线

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5 楼    发表于2011-11-18 20:38:23举报|引用
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引用 3 楼 gkf 在 2011-11-18 09:11:46 的发言:

 再问老师,脱钙液反复用还是用一次倒了,我们一般用好久。


其实也不需要用一次就倒了,用一久后,如果脱钙力度下降,再重新配制!

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heroy 离线

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6 楼    发表于2011-11-18 22:24:39举报|引用
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盐酸的脱钙液也是不错的,建议楼主试试。

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既然岁月无情,又何必虚度青春,像个爷们儿一样战斗吧!

gkf 离线

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7 楼    发表于2011-11-19 10:00:37举报|引用
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 盐酸的浓度和硝酸一样也是用5%-10%吗?

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xkj2797xkj 离线

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8 楼    发表于2011-11-19 10:35:56举报|引用
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引用 7 楼 gkf 在 2011-11-19 10:00:37 的发言:

 盐酸的浓度和硝酸一样也是用5%-10%吗?

硝酸水溶液:硝酸5-10ml,蒸馏水加至100ml

 

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xkj2797xkj 离线

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9 楼    发表于2011-11-19 10:42:21举报|引用
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本帖最后由 xkj2797xkj 于 2011-11-19 10:46:43 编辑
引用 8 楼 xkj2797xkj 在 2011-11-19 10:35:56 的发言:
引用 7 楼 gkf 在 2011-11-19 10:00:37 的发言:

 盐酸的浓度和硝酸一样也是用5%-10%吗?

硝酸水溶液:硝酸5-10ml,蒸馏水加至100ml,不过,盐酸脱钙能使胞核染色不佳!

 


硝酸水溶液:硝酸5-10ml,蒸馏水加至100ml,不过,盐酸脱钙能使胞核染色不佳!

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