gkf 离线
我们用10%的硝酸脱钙,为什么切片时易碎,即使不碎,在染色过程中也容易掉片,求助有经验的技术前辈帮助寻找原因。
xkj2797xkj 离线
5%-10%都行,硝酸是一种很强的脱钙剂,常规应用浓度不要超过10%(5%为佳),时间一般不要长于2-3日,脱钙的组织切片后在染色过程中较容易脱片,建议充分烤片,或者在玻片涂点蛋清甘油,染色时候用自来水或温水返蓝来替代氨水返蓝。切片容易碎有可能是脱钙后(脱钙有可能有点过),组织脱水机脱水有点脱过了的原因!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!本人微信:13759416387)
感谢老师答复!我们脱钙时间为16小时左右,股骨头适当延长时间,然后自来水冲并浸泡去除酸液,较理想的切片也千疮百孔,是不是与疾病有关?如骨质坏死、疏松、纤维化。
再问老师,脱钙液反复用还是用一次倒了,我们一般用好久。
这个可能性小,16小时好像脱钙会欠缺点!
其实也不需要用一次就倒了,用一久后,如果脱钙力度下降,再重新配制!
heroy 离线
盐酸的脱钙液也是不错的,建议楼主试试。
盐酸的浓度和硝酸一样也是用5%-10%吗?
硝酸水溶液:硝酸5-10ml,蒸馏水加至100ml
硝酸水溶液:硝酸5-10ml,蒸馏水加至100ml,不过,盐酸脱钙能使胞核染色不佳!