巴氏染色法
1．试剂配制

（1）Harris苏木素液（同常规组织染色）
    （2）橙黄-G6液：取橙黄-G6 0.5g，溶于95%酒精100ml中，加磷钨酸15mg。

（3）EA36液：

先配制原液（贮备液）：

①亮绿液：亮绿0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加无水酒精至100ml。

②俾士麦棕液：俾士麦棕0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加无水酒精至100ml。

③伊红Y液：伊红Y0.5g，溶于5ml蒸馏水中，溶解后加入无水酒精至100ml。

临用前，将上述亮绿液45ml，伊红Y液45ml，俾士麦棕液10ml混合后，再加入磷钨酸0.2g，饱和碳酸锂水溶液1滴。

也可配制EA50液：

3%亮绿水溶液10ml 纯甲醛250ml

20%伊红Y水溶液20ml  冰醋酸20ml

磷钨酸2g（水溶后加入） 95%酒精700ml

2．染色步骤

（1）将固定后的涂片入水、苏木素染核、盐酸酒精分化、返蓝同HE染色。
   （2）70%、80%、95%酒精逐级脱水各1分钟。
   （3）橙黄G6 3-5分钟。
   （4）95%酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1分钟。
   （5）EA36或EA50液5分钟。
   （6）95%酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1分钟。
   （7）无水酒精Ⅰ、Ⅱ缸洗各1分钟。
   （8）二甲苯Ⅰ、Ⅱ缸透明各1分钟。
   （9）中性树胶封固。
3．染色结果：细胞核为深蓝色；鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞胞质为绿色；表层不全角化细胞胞质为粉红色，完全角化细胞胞质呈桔黄色；高分化鳞癌细胞为粉红色或桔黄色；腺癌细胞质呈灰蓝色；中性粒细胞和淋巴细胞、吞噬细胞胞质均为蓝色；红细胞为粉红色，粘液为淡蓝色或粉红色。