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liuhuanggao 离线
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以下转载MBW关于湿式固定的论述:
所谓“湿”实际是潮湿,即将干未干、又湿又不太湿,这就是“度”。这分两个方面:有黏液标本,立即固定,不分有多湿。液体标本(含血液)就要严格按“度”而行,既不能快,因快而液体流动,不能使蛋白质凝固,也不能将所涂内容物固定于载玻片上;也不能慢,因慢而使潮湿不能保证,也就是干了或失去湿的机会了,涂片中的细胞也就不能及时固定了。湿式固定是适用于任何细胞学标本的原则,但不同标本度的掌握不同,要实验就会有体会。宫颈直接涂片必须湿式固定,也可以以具有黏液的标本对待,但有例外情况。固定好了的标本着色更好,干式固定着色不佳,时间愈长着色愈差。从你的染色看是用EA50,建议你用EA36着色更稳固。你的染色时间更是过长,有悖于染色的基本要素,时间短细胞更透明。
个人感觉,从事细胞学的医师和技术员一定要、必需要掌握湿固定、湿封片,好处多多,用处多多!
湿固定、湿封片的关键点都相似,那就是掌握好“度”!
湿固定不掉片,说起来简单,做起来要有一定的技巧和心领神会。涂片不能厚,预先打开固定瓶盖侯着,把片涂得薄薄的、匀匀的,一抹完就立即投入95%乙醇中固定,一点都不要犹豫,只要够薄一定不掉片。有人会说,涂片材料多就无法涂薄,那么解决的办法就是:取其中的少量涂片,不要取全部涂片,剩下的做细胞块多好啊。
湿封片,一定要脱水彻底,透明充分,那封出来的片,相当的漂亮,鳞状上皮的胞质皱褶看起来就象是蜻蜓的翅膀!
北京医院贺青老师那里湿封片做得不错,03年我曾在贺老师那里学习,湿封片就是向贺老师学的,马正中教授的那本细胞病理学书的内容都非常实用,受益匪浅!