迈新的免疫组化试剂书《免疫组化试剂》一书中有具体操作步骤。

免疫组化双染总的看是一张片子两种抗体+不同的检测系统（辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）+不同的底物显色的过程。

要求：1.尽量在不同细胞或同一细胞不同部位的两种抗原不同颜色的显色；2.两种不同的抗体最好有相同的修复方式。3.如果一抗来自不同种属在试验前可以临时混合后在组织上孵育，如果种属相同只能老老实实的进行，即修复后，第一种一抗+检测系统+显色，第二种一抗+检测系统+显色。切记，免疫组化不同于免疫荧光不能在同一细胞的相同位置同时表达两个不同的抗原，到时候结果判读的时候将是个“飙血”的时刻。