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亲爱的同仁们,我科HE染色对比不好,请问同仁们你们可有什么办法?

510117 离线

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楼主 发表于 2011-07-19 19:49|举报|关注(0)
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我科HE染色,苏木素采取的是Gill改良苏木素,伊红采取的是酸化伊红,都是按照书上的配方来配置的,但是染色的对比总是不好,不知道是什么原因,请教各位同仁可有什么好的办法染好HE切片?
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钝刀 离线

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24 楼    发表于2012-03-05 21:34:46举报|引用
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"10%中性福尔马林3h;85%酒精2h;95%3缸各2h;无水酒精3缸各2小时;二甲苯2缸各40分;石蜡3缸:前2缸各2h,后一缸看剩余时间"

我个人认为这套程序不太合理。酒精起始浓度不要高于70%,95%酒精中时间明显偏长,无水酒精中的时间要减半,原则上不超过2小时。你上传的图片上刀痕明显,可见组织偏硬了。这是起始浓度偏高和脱水过头的表现。另外,让苏木精后要充分水化,让伊红的时间需再延长。

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踏歌 离线

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23 楼    发表于2012-02-01 17:07:17举报|引用
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是不是酒精脱水时间太长了?我看您说就胃镜小标本这样。

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爱笑的萝卜 离线

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22 楼    发表于2012-01-16 19:16:13举报|引用
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你的脱水时间足够了,无水酒精时间足够,若蜡块脆,要减少无水的时间,你的染液用的时间是不是长了,我们这用时间长了颜色不很鲜明,要加点冰醋酸,再不行,就要更换染色液了。

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毛成毅 离线

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21 楼    发表于2012-01-07 14:02:54举报|引用
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引用 10 楼 510117 在 2011-07-26 19:25:00 的发言:
 前一段时间,50个蜡块左右,经常会出现个别几个 组织好像根本没有脱水,包埋的时候软软的,要重新处理后才能切片,都把人弄伤了,脱水试剂都是才换的,为什么会出现这样的情况呢,真是百思不得其解


组织发软这是在脱水过程中脱水透明不够彻底造成的;看了一下你的试剂其实换得很勤了,跟试剂的质量没有关系,主要是时间上面;你试试把二甲苯时间延长,我看了下你的二甲苯总共时间才80分钟,最好大于2:30h;

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xkj2797xkj 离线

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20 楼    发表于2011-08-07 18:12:55举报|引用
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我认为是你的染液的问题,

醇溶性伊红:
0.5%伊红酒精液:醇溶性伊红0.5g+95%酒精100ml
将伊红溶解于酒精中,加冰醋酸1滴。染色时间1-3分钟。(建议你试试这个)
还有Gill改良苏木素的一个特点就是苏木素结晶形成,都是我认为用Harris苏木素更好,伊红用醇溶性伊红,染色后脱水透明的步骤中低浓度酒精时间要很短!
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510117
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(本观点纯属本人意见!仅供参考!本人微信:13759416387)

510117 离线

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19 楼    发表于2011-08-04 19:37:55举报|引用
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我科脱水机时间我是这样设置的:10%中性福尔马林3h;85%酒精2h;95%3缸各2h;无水酒精3缸各2小时;二甲苯2缸各40分;石蜡3缸:前2缸各2h,后一缸看剩余时间

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510117 离线

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18 楼    发表于2011-08-04 19:36:13举报|引用
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17楼同仁,你们科脱水机流程是怎么设置的,可以告诉下吗?

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heroy 离线

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17 楼    发表于2011-08-01 19:23:11举报|引用
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一.片子比较模糊,不知道镜下是不是也是这样,感觉脱水透明的不够,染色最后我们是2道无水脱水,2道二甲本透明。

二.一星期换个二三次,怎么还会出现脱水不够的情况呢

三.大标本染色还可以,小标本可以适当调整下染色时间,可以过染后分化,伊红后面的酒精快点过,楼主试试。

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510117 离线

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9 楼    发表于2011-07-27 19:24:00举报|引用
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 我科脱水机时间我是这样设置的:10%中性福尔马林3h;85%酒精2h;95%3缸各2h;无水酒精3缸各2小时;二甲苯2缸各40分;石蜡3缸:前2缸各2h,后一缸看剩余时间
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游子骄 离线

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10 楼    发表于2011-07-26 20:47:00举报|引用
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 最可能的问题是脱水时间不够,建议把脱水机按照说明书重新设置。
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liaoqiang127618 离线

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11 楼    发表于2011-07-26 20:13:00举报|引用
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 当然,我也想知道你们的固定液是用的什么
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liaoqiang127618 离线

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12 楼    发表于2011-07-26 20:11:00举报|引用
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 一般情况下,500个蜡块对应500ml试剂,我们的试剂都是我自己配置,脱水机的流程都是我一个人在操作,我一般不让别人碰
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liaoqiang127618 离线

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13 楼    发表于2011-07-26 20:08:00举报|引用
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 我的qq476580821(13862529701)
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liaoqiang127618 离线

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14 楼    发表于2011-07-26 20:07:00举报|引用
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 你说说你的脱水机的试剂流程,每一步的时间
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15 楼    发表于2011-07-26 19:25:00举报|引用
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 前一段时间,50个蜡块左右,经常会出现个别几个 组织好像根本没有脱水,包埋的时候软软的,要重新处理后才能切片,都把人弄伤了,脱水试剂都是才换的,为什么会出现这样的情况呢,真是百思不得其解
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16 楼    发表于2011-07-26 19:21:00举报|引用
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 我发现我们科大标本染色还可以,基本都是胃镜的染色是这样,是不是我们的流程出了什么问题?
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510117 离线

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17 楼    发表于2011-07-26 19:20:00举报|引用
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 我科标本量不大,我们一个星期要换2到3次试剂,我们每次换都做记录,我想问下各位同仁,您们科室的脱水机的整个流程时间是怎么安排的?
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liaoqiang127618 离线

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18 楼    发表于2011-07-25 22:18:00举报|引用
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 当然,自己也应该随时抱有尽职尽责的思想和态度,登记每一次换试剂的时间、用量,严格控制每步酒精的浓度,另外,试剂用的长短也和季节有关系,夏天试剂肯定挥发要快些,换的时间适当要缩短,下次应该在什么时候必须换,都要特别注明,不要等到做出来的片子质量不好,才想到去发现问题、解决问题,那样就很有可能有几批片子的质量不是很好,这些都只是鄙人的愚见。
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liaoqiang127618 离线

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19 楼    发表于2011-07-25 22:03:00举报|引用
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 因为你的片子有点灰,脱水不够,固定不是很好,着色很困难并且也不均匀,你可以看看我说的液体你又多久没有换了
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liaoqiang127618 离线

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20 楼    发表于2011-07-25 22:00:00举报|引用
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 我个人觉得应该不是染液的问题,你可以试试把固定液、一缸无水酒精和一缸透明液换换,也许你上面的问题就能解决了

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