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做DAB法 免疫组化
出现了如图所示的现象,是大鼠的脑片。。。。
应该是血管,可是血管应该是染不上颜色的。。。。不知道为什么会这样。请教,谢谢
具体的步骤,如下。。。。
1. 切片用PBS漂洗3次,10min
2. 切片移至3%过氧化氢溶液中,10min
3. PBS漂洗3次,10min
4. 切片浸入3%正常羊血清蛋白(BSA)溶液中,37℃,30min
5. 切片置入一抗4℃冰箱过夜
6. 切片用PBS漂洗3次,每次10min
7. 切片移至二抗, 37℃,30min
8. PBS漂洗3次,每次10min
9. dab显色 10min
10. PBS漂洗3次,每次10min
11. 贴片,干燥
12. 逐级酒精脱水(80%,90%,95%,100%х2每次15min),透明(二甲苯15minх2)树胶封片,晾干
使用的抗体是MILLIPORE的~~~多巴胺受体
http://www.millipore.com/catalogue/item/abn20
求救 !!!!
几乎一学期都这样了,好烦啊,请高人指点