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关于常规石蜡组织切片制作的相关问题

学医人 离线

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楼主 发表于 2011-05-19 12:50|举报|关注(0)
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乳腺癌组织取材,常规经固定及脱水后,是否组织内的水被全部脱出,细胞内的水也被全部脱出了吗?如果没有被全部脱出,还有多少比例的水分留在组织或细胞内?浸蜡过程中,石蜡进入到组织中,那石蜡能进到细胞内吗?还是就只能包绕在细胞外?

    希望各位热心的病理学前辈给出详细的答案,或者提供查找答案的线索。谢谢!

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xclbljys 离线

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1 楼    发表于2011-05-19 21:03:00举报|引用
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本帖最后由 于 2011-05-19 21:06:00 编辑

 

解答网友学医人的提问:

1.组织脱水后,细胞内的水分应该全部脱出,才够标准脱水效果。

2.浸蜡,是指蜡进入组织间隙。请看相关资料内容(一般技术书籍都有此内容)

     脱水就是用脱水剂完全除去组织内的水分,为下一步透明及浸蜡创造条件。此外,脱水还可以使组织再次发生一定的硬化,脱水剂必须是与水在任何比例下均能混合的液体。

     酒精:是制片最常用的试剂,可与水在任何比例下相混合,酒精的脱水能力比较强,又能硬化组织。但是酒精的脱水速度很快,对于组织会有明显的收缩作用。因此在以酒精作为脱水剂时,应该先从浓度较低的酒精开始,然后递增其浓度,这样可以避免组织过度收缩。一般情况下,组织经过70%,80%,90%,95%,以至无水酒精的脱水程序,即可达到脱水的要求。
     脱水的基本原则:从低浓度酒精开始逐渐升到高浓度酒精,以保持组织中的水分完全脱净。一般1cmX1cmX0.2cm大小的组织,脱水全过程仅需要数小时即可达到完全脱水

     在各级浓度酒精内处理的最短时间分别减少到2—4小时也能获得满意的结果。如果组织脱水不尽,随后的透明,浸蜡都会受到影响,致使切片很难以完成。较差质量的切片,很容易造成在染色时脱片,这样的组织蜡块,因其含有一定的水分,一经与空气接触即干燥而凹陷。脱水不尽的组织是不能切出很好的切片的。

     组织脱水后,还要经过一个浸蜡的媒剂透明过程。目的是使石蜡渗透到组织中去,达到包埋的支持作用。常用的脱水剂如酒精等,不能溶解石蜡与之相混合,因此必须使用一种既可以同酒精又能同石蜡相混合的媒剂,当组织脱水后,浸蜡之前将组织投入这种媒剂中。由于两剂能相混合,另一方面也由于这种媒剂比酒精比重大,组织中的酒精就被该媒剂取代,待酒精完全被该媒剂完全取代后,组织即成透明状态,因此我们长称这种媒剂为透明剂,在制片中的这一过程就称为透明过程。实质上透明仅是一种过程而非目的,其所以出现透明现象使因其折光系数改变的缘故。从组织的状态上看,由于组织经过媒剂的作用之后,其折射系数近于组织蛋白的折射系数,从而显示出透明状态。组织一旦呈现透明状态,也说明脱水剂已被媒剂所取代。透明后就可以将组织浸入溶解的石蜡进行浸蜡。

     透明剂很多,一般常用的有二甲苯,苯,甲苯,氯仿,香柏油等。

     组织经媒剂的透明作用之后,移入熔化的石蜡内浸渍,石蜡逐渐浸入组织间隙,取代透明剂,这一程序就叫浸蜡。

 

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许春雷

学医人 离线

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2 楼    发表于2011-05-20 10:52:00举报|引用
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对,石蜡是进入到了组织间隙,但关键是我想请教石蜡有没有进入到了细胞内。还是石蜡就包绕在细胞外部,进不了细胞里面?
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