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请教:返蓝后发现分化不足,能否再次分化?再次分化后还要再次返蓝吗?

aptom 离线

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楼主 发表于 2011-05-02 21:48|举报|关注(0)
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各位老师,我想请教一下:

 

我在做组化复染时,使用Harris苏木素。分化、返蓝后镜下观察,感觉背景还算干净,但是核着色有些过深。请问可以再次把片子丢入分化液分化吗?

 

如果可以的话,分化之后还要再次执行返蓝步骤吗。(我们一般使用PBS返蓝。)

 

另外还想请使用Harris苏木素的同行们指点一下染色时间。我们刚刚从Mayer苏木素换成Harris,目前染色和分化的时间都比较长,染色8min+分化70s左右。我们想同时缩短染色和分化时间。

 

还请诸位不吝赐教。

 

谢谢。

 

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dingwei 离线

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1 楼    发表于2011-05-03 12:12:00举报|引用
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 1、可以任何次数分化,分化的目的就是要苏木素深浅适到好处。一次不行,二次,二次不行三次。。。。。分化过头了可以重染苏木素,然后再分化。。。。。(考虑一下为什么要分化)

2、分化完成后,你觉得深浅适当了,就要蓝化。(考虑一下为什么要蓝化)

3、苏木素的染色时间:一般苏木素染色8min并不长;如果觉得分化时间长,说明染色过深了,可以减少染色时间。染色的关键不在于染几分钟、分化几秒钟,而在于根据你的染液怎么把颜色染得最佳,没有固定的时间。

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kellyminy 离线

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2 楼    发表于2011-05-03 12:49:00举报|引用
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 学习!多谢指教
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xkj2797xkj 离线

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3 楼    发表于2011-05-21 10:29:00举报|引用
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本帖最后由 于 2011-05-23 18:25:00 编辑  完全可以在分化,分化后也要蓝化,不过建议你用温水或自来水返蓝!苏木素应该染的短一些,特别是淋巴结组织!
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(本观点纯属本人意见!仅供参考!本人微信:13759416387)

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