6 Section:The pathogenesis of Hemorrhagic Fever with renal syndrome

第六节 、肾综合征出血热的发病原理

 (一) The tracing of vascular and cellular permeability in mice by Horseradish Peroxidase

(一) 用辣根过氧化物酶在病鼠体内对血管及细胞通透性的示综

一

6-1 Trasverse section of heart of infected mouse showing extravasation of injected peroxidase (HRP) Indicating increased vascular permeability

6-1.感染小鼠心脏横断面，示注入的辣根过氧化物酶因血管通透性增加渗出到血管外(DAB显色)

6-2. Section of mouse heart showing leakage of injected HRP from within to outside of the vessel

6-2. 小鼠心壁切片示辣根过氧化物酶由血管内溢出血管外

6-3. Increase in cellular permeability of fat cells allowed invasion of HRP into their cytoplasm

6-3. 小鼠细胞膜通透性增加，使辣根过氧化物酶进入脂肪细胞

6-4. Renal tubular epithelial cells with positive  HRP(→)in infected mouse

6-4感染小鼠肾曲管上皮细胞浆内有辣根过氧化物酶示细胞通透性增加

6-5. In normal control mouse labeled antibody was limited in the vessels of different caliber in the fat tissue.

6-5. 正常对照小鼠脂肪组织，标记抗体只局限在不同大小的血管中，

References 相关文章

第二节                        杨守京, 刘彦仿, 刘莹莹，李志凯．陈株肾综合征出血热病毒感染乳鼠血管、细胞膜通透性的示综观察．第四军医大学学报  1993;14  (4):247-250

第三节                        Yang Shou jing, Liu Yanfang, Liu Yingying, Li Yuanzhi, Xu Zhikai. Tracing in vivo of the vascular and cellular membranous permeabilities in the experimental infected micewith Chen strain hemorrhagicfever with renal syndrome virus. J Med Coll PLA 1994;9(1):1-4

问题

早期病理及临床材料说明，病人水肿、血管通透性增加。实验材料用伊文思蓝或荧光色素等注入血内，观察色素从血中消失的速度以间接判定血管通透性增加。向体内注入过氧化物酶用DAB显色直接观察血管通透性增加，更重要还显示细胞通透性增加。

 (二) 尸检及活检的同一细胞内存在抗原、抗体及补体

(二) In cells of both autopsy and biopsy tissues antigem ，antibody and complemenmt can be found

1

a)    外围血细胞胶体铁绿色为病毒抗原，胶体金黑色为抗体。一个细胞内存在兔疫复合物

6-6. Periphery white blood cells antigen stained green by colloid iron, antibody was stained black by colloid gold，presence of both antigen and antibody in one cell as immunocomplex

6-7 Double labeling of bone marrow cells，antigen in green by colloid iron， antibody in black by colloid gold

6-7骨髓细胞双标记绿色为病毒抗原(胶体铁)，黑色为抗体(胶体金

相关文章、

1．   肾综合征出血热病毒大鼠组织中病毒抗原和抗体的定位研究及其意义  中华流行病学杂志  1993；14（特1）：218

2 。  杨守京，刘彦仿．流行性出血热患者组织中红细胞病毒抗原抗体及CIq的原位检测．中华微生物及免疫学杂志1992;12(4):261－266

第四节                         杨守京，刘彦仿．流行性出血热尸检组织中的免疫复合物．第四军医大学学报  1992;13(4):314-314

第五节                        Liu YF, Yang SJ, Yan PS. Characterstic of immunocomplex in the autopsy tissues of hemorrhagic fever with renal syndrome. Chin J Histochem Cytochem 1993; 2(4) Suppl:94-95!

第六节                        Liu YanFang, Yang shouJing，Yan PeiSong, Liu YingYing. Characteristics of immunicomplexes in autopsytissues of hemorrhagic fever with renal syndrome. Chin M J 1994; 107(6):444-449

问题

1.临床研究证明出血热病人血内补体下降，又证明血内存在免疫复合物，并在纯化的复合物中分离病毒特异性肽成份。有人也在二例肾組织中定位了抗原、抗体及补体的复合物，我们在尸检及活检细胞内从形态上较全面的定位了抗原抗体及补体。

2、本研究提示在単个分散细胞原发性病变中发现过抗原，致细胞病变不一定是抗原本身的作用，而是免疫复合物的作用。

（三）Tracing of antigen in infected mice by labelled antibogy

(三) 用标记抗体在患病小鼠体内示踪病毒抗原

6-8 Colloid gold labeled antibody was limited within the capillaries of striated muscle of normal mouse.

6-8 金标抗体只局限在正常鼠肌肉血管内

6-9. Leakage of labeled antibody from vessels into mscular cells to combine with antigen in infected mouse

5-7.金标抗体从感染小鼠血管中溢入横纹肌细胞中与抗原结合

6-10. labeled antibody limited in glomerular and stroma vessels in normal mouse

5-8 金标抗体局限在对照小鼠的小球及间质的血管内

6-11. Leakag of labeled antibody from blood vessels into renal cells to combine with antigen

6-11,. 金标抗体从感染小鼠肾血管内溢入肾組织细胞中与抗原结合

6-12. Tracing of gold lebeled antibody to the inclusion body of

 infection mouse forming antigen antibody immunocomplxex

6-12 金标抗体进入感染小鼠包涵体中形成抗体抗原复合物,

References 相关文章

第七节                        Yang Shoujing, Liu Yanfang, LiuYingying, Li Yuanzki, XuZikai. Tracing of the viral antigen by gold-labelled antibodies in the experimentalin fected suckling mice with Chin strain of hemorrhagic fever with renal syndrome. J Med Coll PLA 1994;9(4):155-160

第八节                                                                                        一杨守京, 刘彦仿, 刘莹莹，李志凯．陈株肾综合征出血热病毒感染乳鼠的病毒抗原体内示踪、超微结构观察．第四军医大学学报  1993;14 (4):251-256

Question 问题

1.  注入患病动物的标记抗体最终与抗原相结合，

2.  标记抗体与包涵体相结合，包涵体为颗粒性抗原所在之处。

Injected labeled antibody combined with antigen in the inclusion body.Inclusion body is the site of granular antigen.

（三） Experimental Pathogenesis

  Prepare immunocomplexes by adding into the virus antigen its corresponding monoclonal antibody。 To  prepare soluble immunocomplex when antigen in excess，insoluble immunocomplex when antibody in excess。Inject soluble immunocomplex，insoluble immunocomplex and pure antigen into three groups of nice respectively。 The results indicated that only the soluble immunocomplex can induce severe cellular damages and onset of the disease

(三) 发病原理实验

用病毒抗原加相应单克隆抗体形成免疫复合物，即形成可溶性复合物(抗原过剩)或不溶性复合物(抗体过剩)。分别将可溶性复合物、不溶性复合物及单纯抗原注入三组小白鼠。结果证明只有可溶性复合物可引起严重细胞病变并诱导典型的发病。

一上

6-13 Injection of antigen to experimental mice no cellular damage and onset of disease. The antigen is limited within the lumen of the blood vessels (DAB reaction)

6-13 注入病毒抗原并不引起发病及细胞病变，小鼠小肠抗原只在血管内,(DAB反应)

6-14 Injection of soluble immunocomplex，Soluble immunocomplex in liver cells，antibody green FITC，antigen red TR，immunocomplex yellow (Confocal Laser Scanning Microscopy)

6-14注入可溶性复合物，可溶性免疫复合物进入肝细胞內，绿色FITC为抗体，红色TR为抗原，黄色为抗原抗体复合物。

6-15 Soluble immunocomplex want in the liver cell through endocytosis

6-15 抗原抗体复合物以内吞空泡的形式进入肝细胞

6-17 Immunocomplex in liver cell as secondary lysosomes or phagosomes induce destruction

6-17 可溶性复合物以次级溶酶体的形式存于肝细胞内破坏肝细胞

6-18 Picture of a glomerulus，insoluble immunocomplex mainly deposited in the mensangium of a renal glomerulus。 FITC antigen in green，blue indicats formaton of immunocomplex with C3 labelled by Cy5(Confocal Laser Scanning Microscopy)

6-18 不溶性复合物主要沉积在肾小球系膜内，FITC为抗原呈绿色，蓝色为抗原与Cy5 标记的C3的复合物(共聚焦激光扫描显徽镜)

6-19 24 hours after injection of insoluble complex its deposit was found in the masangium of the glomerulus

6-19 注射不溶性免疫复合物24小时小鼠肾小球系膜内有复合物沉办积

6-20 24 hours after injection of insoluble complex ，its deposit was found under the endothelium of a glomerulus with obliteration of capillary lumen

6-20 注射不溶性免疫复合物24小时小鼠肾小球内皮细胞下复合物沉积伴管腔阻塞。

Insoluble complex was found only in the renal glomeruli，its amount was reduced 72 hours later，Complete disappeared at 168 hours

不溶性免疫复合物仅见于肾小球，72小时逐渐消失，168小时(7天)完全消失

相关文章

1.黄晓峰，刘彦仿，晏培松，杨守京，张远祥。可溶性免疫复合物在肾综合性出血热中的致病作用。中华医学杂志，论著，1998；78（1）：1-5

2.黄晓峰，刘彦仿，王春梅, 杨守京，张远祥, 戴晓汶. 肾综合征出血热不溶性免疫复合物共聚焦显微镜观察. 1997; 18(專集):　４－７

3. 黄晓峰，刘彦仿，王春梅，张远祥，晏培松，肾综合征出血热不溶性免疫复合物的作用 ．第四军医大学学报，１９９７；１８（專集）：３０－３７

4.黄晓峰，刘彦仿，戴晓汶，李向党，黄梅，王春梅，俞郦斌，张运強. 免疫复合物纯引起实验动物组织细胞中脂褐素变化的电斜镜观察.电子显微学报 2002; 21(5): 557-558

5黄晓峰，刘彦仿，卦戴晓汶，奇李向党，黄梅，王春梅，俞郦斌，张运強. 肾综合征出血热可溶性免疫复合物引起实验动物组织细胞中脂褐素增多. 第四军医大学学报，2003; 24(15): 1379-1382

问题

1.抗原购自兰卅生物制品研究所，相应抗体来自第四军医大学微生物教研室按経典方法配制成可溶性复合物及不溶性复合物。

2.80只大鼠分三个实验组，三个对照组，实验组包括可溶性复合物、不溶性复合物及单纯抗原组。对照组包括PAP、生理盐水及不注射任何物质组。

3.只有四周令小鼠注入可溶性复合物后48时出观典型发病症状，活动减少，皮毛耸立，身体蜷曲。

4.可溶性复合物组小鼠的多脏器出现以上病变，抗原但及不溶性复合物组仅有轻微改变。

5.从实验推测人的发病过程: 威染病毒—病毒增殖—免疫反应抗体生成—可溶性复合物---细胞病变---发病

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