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PCR退火温度该怎么计算?

dongchengxiyou 离线

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楼主 发表于 2010-12-17 08:55|举报|关注(0)
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Tm 值是不是用引物的上游和下游的G.C,T,A 值算出来的?退火温度一般是不是Tm 值减去5度?谢谢

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medman_2010 离线

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1 楼    发表于2010-12-17 17:19:00举报|引用
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可以用Tm值来计算

不过依我的经验,现在这个技术很成熟了,其实主要决定与你模板的长度和所用的酶,一般500bp之内,无论用哪个公式一般都可以扩出来,越长要就就越严,现在有软件了,你可以用primer 5,效果不错,用软件算一个出来,试一下,一般都没什么大问题,好运

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dongchengxiyou 离线

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2 楼    发表于2010-12-18 16:59:00举报|引用
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 好的,谢谢

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