楼主 发表于 2010-12-16 11:26|举报|关注(0)

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求助：有人做过肿瘤组织NGAL的反转录PCR吗？

我在实验中遇到了点问题，我选的NGAL引物是130BP，跑出来的电泳在100BP一下，而且出现拖尾，怀疑是引物二聚体。问题一：是因为我的PCR 条件不对吗？顺便说下，我做的退火条件是50度。

文献中没有条件，现在才在摸。听老师说退火温度是Tm 值减去5，我按照Tm=2(A+T)+4(C+G)，是56，那么我是不是应该按退火温度为51，再做一次？另外，我还应该注意什么？非常感谢！！

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