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免疫组化阳性对照主要指的是阳性对照组织,它可以用来验证优化你的试验,阳性对照组织有组织内阳性对照和外部设置的阳性对照组织。
内部阳性对照组织就是在选择实验片子时要找一些含有预期阳性细胞的组织,如测试乳腺癌组织的ER时,你要选择含有一些正常乳腺导管组织的肿瘤切片,这时阳性对照和被测组织在一张切片上所有的试验条件都相同,不管肿瘤是否表达ER但是正常导管都或多或少的表达ER,这时对照成立你才可以判定你的免疫组化试验是否成立。
不是所有组织都有内对照,这种情况下你可以在切片上,在被测组织周围粘附一张已知某抗体阳性的组织作为被测组织,试验结果也是依据阳性成立状态来判读你的免疫组化结果,这种用一个组织来做阳性对照的缺点是,切片中抗原的强度可能会影响你对试验的判读,如阳性组织本来是强阳性的,而你做出来的是中度阳性或弱阳性时候,你的预测的抗原却是阴性,是否有假阳性的可能?
我实验室中现在用多点组织芯片做阳性对照(组织芯片中包括强阳性、极弱阳性和阴性对照的芯点)这样我对试验的观察时不但可以回答对照是否成立,操作是否正确,被测组织抗原半定量和一些特异性的问题。