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请教抗体相关技术

stgowest 离线

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楼主 发表于 2009-09-25 22:11|举报|关注(0)
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应用于免疫印迹或免疫沉淀的抗体而没有说明能够应用于免疫组化的抗体,能做福尔马林固定的组化蜡块切片的免疫组化吗?
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yang 离线

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1 楼    发表于2009-09-25 23:09:00举报|引用
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 要看是什么公司的抗体,如果是国外大公司的抗体,他们通常都做过免疫组化测试,如果测试结果阴性才没有说明能够应用于免疫组化。如果你还没有购买就不要购买此类产品,如果你已经购买那就只能试试看。
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海上明月 离线

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2 楼    发表于2009-09-27 12:04:00举报|引用
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 有的抗体是可以的。如果拿到手的是浓缩型一抗,请从低倍比到高倍比稀释至少5个浓度试试,即1:25,1:50,1:100,1:200,1:400;如果有阳性的结果,就选背景低的试用,在背景稍高才出阳性的,那还要在那个浓度再逐渐减低浓度再试3-5个浓度,例如,如果是1:200出阳性结果但背景较深,就再用1:180,1:150,1:120试试看。根据最佳效果原则确定使用浓度。需要根据文献已知阳性的组织作阳性对照,以PBS缓冲液替代一抗做阴性对照。如果1:25的浓度都做不出来阳性结果,那估计这个抗体只适用于免疫印迹或免疫沉淀。
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王军臣

梦里夏花 离线

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3 楼    发表于2009-09-27 20:19:00举报|引用
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以下是引用海上明月在2009-9-27 0:04:00的发言:

 有的抗体是可以的。如果拿到手的是浓缩型一抗,请从低倍比到高倍比稀释至少5个浓度试试,即1:25,1:50,1:100,1:200,1:400;如果有阳性的结果,就选背景低的试用,在背景稍高才出阳性的,那还要在那个浓度再逐渐减低浓度再试3-5个浓度,例如,如果是1:200出阳性结果但背景较深,就再用1:180,1:150,1:120试试看。根据最佳效果原则确定使用浓度。需要根据文献已知阳性的组织作阳性对照,以PBS缓冲液替代一抗做阴性对照。如果1:25的浓度都做不出来阳性结果,那估计这个抗体只适用于免疫印迹或免疫沉淀。

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stgowest 离线

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4 楼    发表于2009-10-02 15:15:00举报|引用
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 谢谢各位
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wuyuhu2046 离线

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5 楼    发表于2010-03-26 11:25:00举报|引用
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代做科研免疫组化HE切片各种特殊染色 15102031966 广州 张先生
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湖南老鬼 离线

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6 楼    发表于2010-04-18 12:11:00举报|引用
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 应该可以做,不过有要求的,同志说了很多,但要注意的是看看免疫印迹或免疫沉淀对抗体的稀释要求吧,可以少走弯路。
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陈森林
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