38岁,子宫多发性肌瘤.

我还想请教一下各位老师,我每次制的片核的颜色都有点深,我们医院用的珠海丽拓公司的染色剂,所有有关TCT的仪器都是他们提供的,我严格按照操作步骤做的,可染色效果还是不太好.请老师谈谈你们的经验好吗?

染色过程是比较忌讳＂严格＂按操作要求去做的．我更重视灵活．要善于根据已染片子评价染色各步操作是否恰当，以便调整．

从这张片看，染液还是浆就可以用的，核的表现不是问题，问题是浆的表现可能会出问题，比如角化细胞，角化癌细胞．

建议你延长苏木素后的盐酸酒精作用时间，目前可延长一倍至两倍．再延长ＥＡ后的酒精时间，可延长２倍．试试，绝对改善．切记，从片子看，苏木素和ＥＡ的时间不能缩短．

这些不是修复细胞．

 对于液基的染色问题：千差万别不为过。这个染色深了之后就导致核看起来很吓人：核深染主要与苏木素浓度、染色时间和染色的问题（液体问题）及后面的分色液相关。您这个很可能是没有进行分色的。因为您用的是国产的试剂的话制片和染色需要您的技术员好好的琢磨，找一个最好的制片和染色状态。也是巴医生说的需要“灵活”使用和处理。但是全部用原装进口的就得严格按照步骤来；一秒都不能省；因为都自动化了；人只要严格按照程序来；不能做任何改动；否则就达不到预期的效果：在我们这里就出现过老技术员不及刚学的技术员的事情；就是因为他喜欢自己灵活处理。后来我就要求：你在没有找出好的方法和数据之前不要做任何改动；因为我们中国人都喜欢小聪明、能省的就省、开始感觉偏差不大；时间久之后就偏差大了。

最后建议：该严格的步骤一定要严格：比如苏木素的配制、时间、温度要严格；分色液（稀盐酸）的时候可以自己多试几次、时间长了颜色很淡、短了达不到分色效果、可以适当灵活处理；橙黄G的时间可以灵活；但是EA液需要严格按照时间和温度来；最后也按照要求过二甲笨透明（我们最后用三个）；脱水时间要充分；更换试剂要及时。就说这么多了；有问题再留言；希望您做出好的涂片给大家分享。

巴氏染色简化程序

1、            涂片置于95%的乙醇中固定15分钟。

2、            流水中冲洗10-20秒（也可以用一杯清水中静置1    分钟。

3、            苏木素染液中染色40-60秒，流水中漂洗多余染液（或在一杯清水中静置之1分钟。

4、            95%乙醇中脱水1-2分钟。

5、            橙黄中染色10-30秒。

6、            95%乙醇中洗净橙黄（约20秒）

7、            EA50中染色3-5分钟。

8、            95%乙醇中洗洗净多余染液（约20秒）

9、            无水乙醇中脱水1-2分钟。

10、       二甲苯中透明2分钟，干后中性树胶封片。

附：染色结果：

   角化前上皮细胞：核紫色，核仁红色；胞质绿色或蓝色

   角化上皮细胞：核蓝紫色，核仁红色；胞质粉红色

   超老化细胞：核蓝紫色，核仁红色；胞质橙黄色

   白细胞：核蓝紫色；胞质绿色或淡蓝色

   红细胞：红色

   黏液：淡蓝或粉色

这就是我们用的染色方法，里面好象没有稀盐酸分化这一步骤，是不是不行啊？

 我的天呀，您的步骤还真的简化；我敢肯定这个厂家的技术人员肯定不是一个合格的技术员；把我们20多步的简化成10步；真是一个“天才”。这就是为什么每次这么深不奇怪了。我建议您加一些步骤来改善：

1、3之后加0.5%的稀盐酸10S；后清水冲洗（蒸馏水更好）

2、接着放到饱和碳酸摇匀放置1分钟

3、接着放到95%的乙醇1-2分钟

接着您的第4步

第6步之后加一个95%乙醇或者无水乙醇1-2分钟

第8步之后加一个95%和两个无水乙醇

最后至少还要加一个二甲苯；这样总共是18个缸子了；您试一下；效果应该好很多。