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想请教各位老师一个关于细胞爬片的问题

anbc1983 离线

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楼主 发表于 2009-06-22 13:27|举报|关注(0)
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各位老师:

    最近想在细胞爬片上做活细胞的免疫组化,不知道和组织上做有什么区别?还有抗体的选择?是不是能做冰冻的抗体就能做细胞爬片?谢谢大家!

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超级学徒 离线

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1 楼    发表于2009-06-24 23:43:00举报|引用
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 1、和冰冻组织做没有多大区别,不过你要用打孔剂打孔;

2、爬片爬好了好要什么防脱?

3、同时爬几张吧,设置对照,

4、一抗根据说明书选择

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anbc1983 离线

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2 楼    发表于2009-06-23 10:07:00举报|引用
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        谢谢楼上的两位老师,大概是我没表达清楚,其实其实就是细胞爬片后做个组化而已,因为以前没做过所以想问问大家。
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强子 离线

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3 楼    发表于2009-06-22 21:10:00举报|引用
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 楼上的yang老师

或许是您理解错了

或许是作者写错了

真的要做活细胞的免疫组化的话

是要用荧光标记的抗体然后用荧光显微镜或者用激光共聚焦

我认为作者其实就是想问一下在试验中

细胞爬片后做个免疫组化而已

研究生课题中很多这样做的

当然具体是什么要楼主解释

我已经发了信息给他/她

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yang 离线

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4 楼    发表于2009-06-22 20:34:00举报|引用
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 在活细胞上进行免疫细胞化学的研究要注意几个问题:1.试验中如何保持细胞存活!2.活细胞上有完整的细胞膜,抗体分子量较大如何在不破坏细胞膜完整性而通过细胞膜?当然细胞膜定位的抗体例外!3.通常抗体为了保存都会加防腐剂,如果要做活细胞的免疫细胞化学是要特别注明选用不含防腐剂的抗体。
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强子 离线

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5 楼    发表于2009-06-22 18:22:00举报|引用
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 细胞爬片上做活细胞的免疫组化

你说的可是细胞爬片后,经过固定等步骤,然后检测某种抗体?
此时还能叫活细胞吗?

如果就是我说的情况的话:

1.可以做

2.注意用防脱片剂处理一下玻片。(实际情况是我们没用,细胞也还好)

3.注意对照组的设置及对照条件的设置

4.抗体要咨询公司,明确是否可以用于细胞。一般情况下用于组织的都可以用于细胞。

5.个人认为与组织学最大的区别可能就是不必做抗原修复了

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anbc1983 离线

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6 楼    发表于2009-06-22 14:07:00举报|引用
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 谢谢,楼上的老师,呵呵!
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7 楼    发表于2009-06-22 13:29:00举报|引用
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 第一个听到这样一个问题,敬请知道的网友和老师们友情回复。
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