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求助 HE染色

biosci 离线

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楼主 发表于 2009-04-25 19:14|举报|关注(0)
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心脏HE染色细胞质呈深紫色,而且细胞间边界不清楚,感觉沾着很多曙红染料颗粒的样子。
染色步骤

二甲苯(Ⅰ)                            10 min

二甲苯(Ⅱ)                            5min

100%乙醇                                1min

95%乙醇                                 1min

85%乙醇                                 1min

50%乙醇                                 1min

蒸馏水                                  1min

苏木精液染色                            20min

流水稍洗去苏木精液                        

1%盐酸乙醇                                 3 s

稍水洗                                  

0.25%氨水返蓝                            20s

蒸馏水                                  1min

50%乙醇                                 1min

85%乙醇                                 1min

95%乙醇                                 1min

0.5%曙红液染色                           1s

蒸馏水稍洗                                 

95%乙醇                                 1min

无水乙醇                                1min

无水乙醇                                1min

二甲苯(Ⅰ)                              2 min

二甲苯(Ⅱ)                              2 min.
伊红原来采用的是0.5%浓度,后来觉得太浓,又稀释了四倍,染色时间1s.但细胞质仍然染得很深,封片时看组织就是很浓的红色。

后来做了一个只染苏木精不染伊红的对照,结果发现细胞质不是完全透明的,里面有些黑糊糊的东西,不知是不是这个原因。

我也试验过不同的分色时间,短了没有用,长了细胞质的颜色倒是正常了,细胞核已经完全不见了

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lingxg 离线

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1 楼    发表于2009-04-25 19:48:00举报|引用
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 苏木精染色时间过长,且没有流水洗净。
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dq17529 离线

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2 楼    发表于2009-04-26 22:37:00举报|引用
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