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帮我看看这片,在制片过程中哪个步骤错

zLY123 离线

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楼主 发表于 2009-04-09 18:19|举报|关注(0)
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帮我看看这片,在制片过程中哪个步骤错

是苏木素染得太深,还是片切得太厚。如何补救?

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本帖最后由 于 2009-04-09 18:26:00 编辑
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花果山 离线

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1 楼    发表于2009-04-09 22:02:00举报|引用
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 感觉片子厚,关键还是标本固定不佳。标本重新固定再制片
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zLY123 离线

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2 楼    发表于2009-04-09 23:00:00举报|引用
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 请教一下,AF液固定两小时,,,你们一般固定多久?
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lvgq 离线

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3 楼    发表于2009-04-09 23:03:00举报|引用
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 两小时有点少了。
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今点先生 离线

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4 楼    发表于2009-04-09 23:12:00举报|引用
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 切片太厚

苏木素过染

透明不够

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zLY123 离线

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5 楼    发表于2009-04-10 12:32:00举报|引用
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 切片是5微米,脱腊二甲苯1.2瓶各10分钟,苏木素染3-4分钟,请教,树胶与二甲苯的比例最好为多少。??

请教以上时间应改为多久会好些..

标本是中性甲醇固一天,取完材上机脱水,AF液固定2小时,

请问一下,AF 液固定时间要多久才会好点

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大雪纷飞 离线

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6 楼    发表于2009-04-10 15:24:00举报|引用
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 切片较厚,染色还行吧,水洗充分点.
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渴望远足

今点先生 离线

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7 楼    发表于2009-04-19 22:30:00举报|引用
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以下是引用zly123在2009-4-10 12:32:00的发言:

 切片是5微米,脱腊二甲苯1.2瓶各10分钟,苏木素染3-4分钟,请教,树胶与二甲苯的比例最好为多少。??

请教以上时间应改为多久会好些..

标本是中性甲醇固一天,取完材上机脱水,AF液固定2小时,

请问一下,AF 液固定时间要多久才会好点

中性甲醇固一天?

二甲苯稀释树胶没有固定的标准,太稀了盖玻片和载玻片的吸附和粘着力不够,时间久了会脱离开来,太浓了封片的胶层厚,颜色偏黄,影响镜下的折光率,而且不容易排出气泡,新开瓶的树胶一般先用段时间再用二甲苯稀释.保持适当的浓度.

 

要看你的组织类型和取材的厚薄,AF液的固定一般不低于2.5小时,只要标本上机后第二天不影响继续切片制作的时间,固定时间尽量延长点,标本固定不充分,会影响后边的脱水和透明的效果的.

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Ludy 离线

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8 楼    发表于2009-05-23 10:13:00举报|引用
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 中性甲醛固定液固定一天是可以的,固定液的渗透能力是1mm/h,但组织固定后表面硬化会影响固定液的进一步渗入,一般固定时间12-24h

我感觉问题还是切片太厚,透明不够,在二甲苯I中浸泡时间长点,水洗充分后再入苏木素

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永恒爱恋 离线

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9 楼    发表于2009-08-23 17:20:00举报|引用
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houfang 离线

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10 楼    发表于2009-08-27 22:17:00举报|引用
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追逐太阳 离线

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11 楼    发表于2009-08-30 20:51:00举报|引用
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以下是引用今点先生在2009-4-19 22:30:00的发言:

以下是引用zly123在2009-4-10 12:32:00的发言:

 切片是5微米,脱腊二甲苯1.2瓶各10分钟,苏木素染3-4分钟,请教,树胶与二甲苯的比例最好为多少。??

请教以上时间应改为多久会好些..

标本是中性甲醇固一天,取完材上机脱水,AF液固定2小时,

请问一下,AF 液固定时间要多久才会好点

中性甲醇固一天?

二甲苯稀释树胶没有固定的标准,太稀了盖玻片和载玻片的吸附和粘着力不够,时间久了会脱离开来,太浓了封片的胶层厚,颜色偏黄,影响镜下的折光率,而且不容易排出气泡,新开瓶的树胶一般先用段时间再用二甲苯稀释.保持适当的浓度.

 

要看你的组织类型和取材的厚薄,AF液的固定一般不低于2.5小时,只要标本上机后第二天不影响继续切片制作的时间,固定时间尽量延长点,标本固定不充分,会影响后边的脱水和透明的效果的.

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中中中 离线

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12 楼    发表于2009-09-20 20:50:00举报|引用
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本帖最后由 于 2009-09-20 20:51:00 编辑

就这两张切片而言,我认为是染色时脱蜡不充分所致。要注意二甲苯使用了多长时间及其浓度或切片接触的时间长短。

致于固定时间0.1-0.2cm的组织块固定2小时,应不致产生如此严重后果.

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梦里夏花 离线

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13 楼    发表于2009-09-27 21:30:00举报|引用
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切片上有很多小裂痕(细胞间)这是摊片时水温过高造成的,特别是肝脏、淋巴结、脑子、脾脏、血凝块等组织,应当将摊片的水温下调,控制在45度到47度左右。

苏木素染色时间长,不要紧的,可以在盐酸酒精中分化,但要控制恰当,分化时间太长,细胞核结构太淡无法看清楚;分化时间太短,细胞核结构一团黑,更是无法看清核内结构。分化时间要恰到好处,多摸索一下就知道了。

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yoyo 离线

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14 楼    发表于2009-09-29 21:51:00举报|引用
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固定时间太短,没得救了
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zLY123 离线

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15 楼    发表于2009-10-07 11:13:00举报|引用
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 谢谢!
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moonriver 离线

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16 楼    发表于2009-10-08 17:34:00举报|引用
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苏木素过染

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